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學(xué)有機(jī)的,怎樣做才能把柱子過好?

提問時(shí)間:2021/2/25 15:43:31
學(xué)有機(jī)的,怎樣做才能把柱子過好?

2條回復(fù):

匿名
2021/2/25 15:43:55
?一般來說,爬板是走柱子的基礎(chǔ)。但是,由于板上的硅膠和柱子里的硅膠有些差別,而且板的分離效率與遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于柱子的分離效率,因此分不開時(shí)正常的。 盡量將柱子裝運(yùn)均,裝結(jié)實(shí),用洗脫液實(shí)現(xiàn)平衡柱子,效果會(huì)好一些。 裝柱子時(shí),下邊用真空泵抽氣,多次少量加入硅膠,不斷用膠皮抽打。 進(jìn)樣時(shí),盡量將樣品平鋪。 加入洗脫液時(shí),動(dòng)作要緩。 最后,可長(zhǎng)時(shí)減下洗脫梯度。
匿名
2021/2/25 15:45:57

濕法裝柱, 第一要選溶劑,通常是洗脫劑或者洗脫劑中的小極性單一溶劑。

第二要攪拌均勻,就是將柱層析硅膠用上述溶劑浸泡后攪拌至流動(dòng)性很好且沒有氣泡為止。

第三是倒至柱子中,最好一次倒入,不要分批;可以在柱子上端接一段溶劑球,把所有浸泡好的硅膠(要攪拌起來)一次倒入。

第四是敲柱子,我通常都是用一對(duì)20號(hào)橡膠塞,從下至上緩慢輕敲,敲兩個(gè)來回后將柱子轉(zhuǎn)45度后再重復(fù)敲,如此敲三圈,觀察硅膠沉降基本完全即可。敲的時(shí)候,柱子中的溶劑可以有很多,此時(shí)可打開下面的節(jié)門,邊流邊敲;也可以先放溶劑至硅膠表面,再敲使得硅膠沉降、溶劑出來。這步是關(guān)鍵步驟,而且硅膠表面溶劑不能干。 如此,基本裝好啦。



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