果膠酶活性檢測試劑盒 微量法
產(chǎn)品內(nèi)容：提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存。 試劑一：液體 25mL×1 瓶，4℃保存。若溶液中有不溶解物質(zhì)，可以 50℃水浴溶解。 試劑二：液體 20mL×1 瓶，4℃避光保存。 標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支，10mg 半乳糖醛酸。臨用前加入 0.943mL 蒸餾水，配成 50µmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)液
產(chǎn)品說明：果膠酶（pectinase）是分解果膠的酶類，包括原果膠酶，果膠酯酶，多聚半乳糖醛酸酶和果膠 裂解酶四大類，廣泛存在于高等植物果實(shí)和微生物中，是水果加工中重要的酶。 果膠酶水解果膠生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸與 DNS 試劑反應(yīng)生成在 540nm 有特征吸收峰的 棕紅色物質(zhì)，測定 540nm 處吸光值變化可計(jì)算得果膠酶活性。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑： 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、微玻璃比色皿/96 孔板、可調(diào)式移液槍、研 缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提?。?組織：按照組織質(zhì)（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。 菌類：按照細(xì)胞數(shù)（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加 入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）；然后 10000g， 4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。 液體：直接檢測。
相關(guān)文獻(xiàn)：
《Transcription factor VmSeb1 is required for the growth, development, and virulence in Valsa mali》 作者:Yuxing Wu,Liangsheng Xu,Zhiyuan Yin,Hao Feng,Lili Huang 期刊:Microbial Pathogenesis 影響因子:2.332 PMID:29959044
《Two members of the velvet family, VmVeA and VmVelB, affect conidiation, virulence and pectinase expression in Valsa mali》 作者:Yuxing Wu , Liangsheng Xu , Zhiyuan Yin , Qingqing Dai , Xiaoning Gao, Hao Feng , Ralf T. Voegele , Lili Huang 期刊:Molecular Plant Pathology 影響因子:4.379 PMID:29127722
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